茶多酚酒石酸亚铁比色法

茶多酚酒石酸亚铁比色法

茶多酚酒石酸亚铁比色法是一种常用的测定茶叶中茶多酚含量的方法。其原理是 过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。以下是该方法的具体步骤和计算公式：

实验原理

酒石酸亚铁分光光度比色法基于以下化学反应：

[ \text{茶多酚} + \text{酒石酸亚铁} \rightarrow \text{紫褐色络合物} ]

试剂准备

酒石酸亚铁溶液

称取1.00g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）和5.00g酒石酸钾钠（C4H4O6NaK·4H2O），混合后加蒸馏水溶解，定容到1000mL。

pH7.5磷酸盐缓冲液

称取60.20g Na2HPO4·12H2O和5.00g NaH2PO4·12H2O，混合后加蒸馏水溶解，定容到1000mL。

操作步骤

标准曲线的制作

可参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法，或使用经验值：当吸光度值为1.00时，供试液中茶多酚的浓度为7.826mg/mL。

样品总多酚的提取

准确称取1.0g磨碎并混匀的茶叶样品于200mL三角瓶中，加入80mL沸水，并在沸水浴中保温浸提30分钟，然后过滤、洗涤滤渣，将滤液合并、冷却、加蒸馏水定容至100mL。

样品多酚提取液的测定

吸取1mL样品多酚提取液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液，摇匀，再用pH7.5磷酸盐缓冲液稀释至刻度，混匀。

使用10mm比色杯，在波长540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A）。

计算方法和公式

茶叶中茶多酚的含量（以干态质量百分率表示）按下式计算：

[ \text{茶多酚含量} （\%） = \left（ \frac{A \times 1.957 \times 2}{L1 \times M \times m} \right） \times 100 ]

其中：

\（ A \） 为试样的吸光度

\（ L1 \） 为试液的总量（mL）

\（ M \） 为试样的质量（g）

\（ m \） 为试样干物质含量百分率（%）

1.957 为当吸光度等于0.50时，每毫升茶汤中含茶多酚的毫克数。

注意事项

实验中应使用分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水。

测定过程中需注意比色皿的清洁和参比溶液的制备。

重复测定时，应确保样品处理的一致性和准确性。

通过以上步骤和计算公式，可以较为准确地测定茶叶中的茶多酚含量。